恒一生物科研技術(shù)團隊已全面推出構建永生化細胞系技術(shù)服務(wù)，可以使原代細胞轉化為正常的二倍體細胞，誘導細胞持續增殖，為基因編輯細胞系構建、WB等實(shí)驗提供細胞素材。本公司開(kāi)發(fā)了致癌基因表達和基因編輯的兩種方法進(jìn)行細胞永生化服務(wù)。

永生化細胞系簡(jiǎn)介

正常組織來(lái)源的細胞在體外培養條件下可發(fā)生增殖和分裂，然而，體外經(jīng)過(guò)有限次（1-3代）的傳代后，就會(huì )發(fā)生衰老和凋亡。但是，某些在體外培養的原代細胞經(jīng)過(guò)自發(fā)的或受外界因素的影響從衰老機制中逃離，從而具有無(wú)限增殖能力并可以無(wú)限傳代的細胞系稱(chēng)為永生化細胞系。原代細胞自發(fā)永生化的幾率非常小，因此，通過(guò)基因轉染等技術(shù)將外源基因轉入原代細胞內，從而建立永生化細胞系。

目前，人們已建立了多種細胞永生化的方法，包括：SV40病毒感染人和嚙齒動(dòng)物細胞后，病毒DNA隨機整合至宿主基因組，其早期區基因編碼的SV40T抗原可導致細胞的永生化，是建立永生化細胞株的常用方法之一。原代細胞端粒酶激活也能是某些細胞永生化。在原代培養的細胞中將人端粒酶催化亞基(hTERT)基因整合到基因組中能穩定端粒的長(cháng)度，使細胞易于永生化。然而，對于有些細胞，端粒酶激活后并不足以使細胞永生化，還需要借助SV40法。目前，已有許多嚙齒動(dòng)物細胞，如小鼠胚胎成纖維細胞和小鼠星形膠質(zhì)細胞，已成功地被SV40T抗原永生化且被轉染的成纖維細胞傳代延長(cháng)達20-30代。利用含端粒酶逆轉錄酶和SV40T抗原的重組逆轉錄病毒感染，對大鼠腸細胞進(jìn)行轉染，建立了永生化的細胞系。此外，也有研究者利用HPV16E6E7 轉染人子宮頸上皮細胞，建立了永生化的細胞系。盡管目前有多種細胞永生化的方法，但不同的方法不一定會(huì )使原代細胞永生化。由于細胞的物種來(lái)源和組織部位不同，其細胞增殖和凋亡機制也不盡相同，因此，每種原代細胞永生化的分子機制也不盡不同，其永生化細胞的方法也不同。

永生化細胞系特點(diǎn)

1、 能夠無(wú)限增殖；

2、 在一定傳代數范圍內，保持正常二倍體染色體核型；

3、 能篩選單克隆細胞；

4、 構建CRISPR/Cas9敲除細胞系。

永生化細胞系應用

服務(wù)說(shuō)明：

提供活力較強的原代細胞或委托恒一進(jìn)行原代細胞培養

最終交付：

兩瓶25cm²培養瓶的永生化細胞；

凍存的原代細胞3管；

永生化培養細胞圖片和COA報告。

服務(wù)流程：

訂單接收-簽定合同-永生化細胞系構建-鑒定-發(fā)貨。

如何訂購：

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